產(chǎn)品英文名稱：Vero Cell HCP ELISA kit
產(chǎn)品中文名稱：Vero 細(xì)胞宿主蛋白免疫檢測(cè)試劑盒

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Vero Cell HCP ELISA kit產(chǎn)品介紹：
病毒疫苗或其它治療用蛋白在Vero細(xì)胞中表達(dá)是商業(yè)用大量生產(chǎn)藥物原料產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便方法。Vero Cell HCP ELISA試劑盒開發(fā)使用了不同終端產(chǎn)品和中試樣品，４種不同疫苗產(chǎn)品是從疫苗生產(chǎn)商獲得，包括全病毒疫苗和重組蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具有廣泛反應(yīng)性，強(qiáng)吸附性的多克隆抗體，可以鑒定出所有Vero細(xì)胞系中高度保守的HCP。產(chǎn)品靈敏性強(qiáng)（zui低檢測(cè)濃度達(dá) 0.7ng/mL）和具有高度特異性，可以應(yīng)用于任何在Vero細(xì)胞中表達(dá)的蛋白產(chǎn)物。

§檢測(cè)原理：Vero Cell檢測(cè)是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。樣本中包含的Vero Cell HCPs蛋白與標(biāo)記有抗- Vero Cell抗體的辣根過(guò)氧化物酶同時(shí)反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗- Vero Cell蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作 用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測(cè)定水解物濃度，水解物濃度與Vero Cell HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出Vero Cell HCPs蛋白含量。

§檢測(cè)過(guò)程：取出所有試 劑平衡到室溫→分別移取50µl標(biāo)準(zhǔn)液，對(duì)照物和樣品至待測(cè)孔→移取100µl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時(shí)，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100µl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

§結(jié)果分析：標(biāo)準(zhǔn)液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測(cè)定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會(huì)出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要滴定到兩個(gè)小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。

Vero Cell HCP ELISA組成成份：
● Anti- Vero Cell:HRP(辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記)　          1x12mL   F501(Product#)
● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　                       12x8孔　  F502
● Vero Cell HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)   1mL/瓶　 F503
● Stop Solution終止液(0.5N硫磺酸)  　　　             1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)　                             1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)　                   1x50mL   F004

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